A TESZT ÖSSZEFOGLALÁSA ÉS MAGYARÁZATA
A malária szúnyogok által terjesztett, hemolitikus, lázas betegség, amely több mint 200 millió embert fertőz meg, és évente több mint 1 millió ember halálát okozza.A Plasmodium négy faja okozza: P. falciparum, P. vivax, P. ovale és P. malariae.Ezek a plazmódiák mind megfertőzik és elpusztítják az emberi eritrocitákat, hidegrázást, lázat, vérszegénységet és lépmegnagyobbodást okozva.A P. falciparum súlyosabb betegségeket okoz, mint a többi plazmodiális faj, és a legtöbb maláriás halálesetért felelős.A P. falciparum és a P. vivax a leggyakoribb kórokozók, azonban a fajok elterjedése jelentős földrajzi eltéréseket mutat.
Hagyományosan a maláriát úgy diagnosztizálják, hogy az organizmusokat Giemsával festett vastag perifériás vérkeneteken mutatják be, és a különböző plazmódiumfajokat a fertőzött eritrocitákban való megjelenésük alapján különböztetik meg1.A technika pontos és megbízható diagnózisra képes, de csak akkor, ha szakképzett mikroszkópos szakember végzi el meghatározott protokollok2 alkalmazásával, ami komoly akadályokat jelent a világ távoli és szegény területein.
A Malaria Pf / Pan Antigen Rapid Test Kit ezen akadályok megoldására lett kifejlesztve.A teszt egy pár monoklonális és poliklonális antitestet használ a P. falciparum specifikus fehérjére, a Histidin Repeat Protein II-re (pHRP-II), valamint egy pár monoklonális antitestet a plasmodium Lactate Dehydrogenase (pLDH) ellen, amely a plazmodium négy faja által termelt fehérje, így lehetővé teszi bármely más P. falciparum fertőzés kimutatását és szimulációját. plazmódia.Képzetlen vagy minimálisan képzett személyzet végezheti laboratóriumi felszerelés nélkül.
ELV
A Pf/Pan Malaria Rapid Test kit egy laterális áramlási kromatográfiás immunoassay.A tesztcsík komponensei a következőkből állnak: 1) egy bordó színű konjugált párna, amely egérkolloid arannyal konjugált pHRP-II elleni egér antitestet (pHRP II-arany konjugátumok) és arannyal konjugált egér anti-pLDH antitestet (pLDH-arany konjugátumok) tartalmaz,
2) egy nitrocellulóz membráncsík, amely két tesztcsíkot (Pan és Pv sávok) és egy kontrollcsíkot (C sáv) tartalmaz.A Pan sáv előzetesen monoklonális anti-pLDH antitesttel van bevonva, amellyel a négy plazmódiafaj bármelyikével kimutatható a fertőzés, a Pf sáv előzetesen poliklonális anti-pHRP-II antitestekkel van bevonva a Pf fertőzés kimutatására, a C sáv pedig kecske anti-egér IgG-vel van bevonva.
A vizsgálat során megfelelő mennyiségű vérmintát adagolunk a tesztkazetta mintaüregébe (S), majd lízispuffert adunk a pufferüregbe (B).A puffer olyan detergenst tartalmaz, amely lizálja a vörösvérsejteket, és különféle plazmódium antigéneket szabadít fel, amelyek kapilláris hatás révén vándorolnak át a kazettában lévő csíkon.A pHRP-II, ha jelen van a mintában, a pHRP II-arany konjugátumokhoz kötődik.Az immunkomplexet ezután a membránon felfogják az előre bevont anti-pHRPII antitestek, bordó színű Pf sávot képezve, amely Pf pozitív teszteredményt jelez.A pLDH, ha jelen van a mintában, kötődik a pLDH arany konjugátumokhoz.Az immunkomplexet ezután az előre bevont anti-pLDH antitest rögzíti a membránon, bordó színű Pan sávot képezve, jelezve a plazmódium pozitív teszteredményt.Pan-sáv hiányában a másik három plazmódia bármelyikére pozitív teszteredmény javasolható.
A tesztsávok (Pan és Pf) hiánya negatív eredményre utal.A teszt tartalmaz egy belső kontrollt (C sáv), amelynek bordó színű sávot kell mutatnia a kecske anti-egér IgG / egér IgG immunkomplexumából (pHRP-II és pLDH-arany konjugátumok), függetlenül attól, hogy bármelyik tesztsávon milyen színfejlődés alakult ki.Ellenkező esetben a vizsgálati eredmény érvénytelen, és a mintát újra meg kell vizsgálni egy másik eszközzel.
