A TESZT ÖSSZEFOGLALÁSA ÉS MAGYARÁZATA
A malária szúnyogok által terjesztett, hemolitikus, lázas betegség, amely több mint 200 millió embert fertőz meg, és évente több mint 1 millió ember halálát okozza.A Plasmodium négy faja okozza: P. falciparum, P. vivax, P. ovale és P. malariae.Ezek a plazmódiák mind megfertőzik és elpusztítják az emberi eritrocitákat, hidegrázást, lázat, vérszegénységet és lépmegnagyobbodást okozva.A P. falciparum súlyosabb betegségeket okoz, mint a többi plazmodiális faj, és a legtöbb maláriás halálesetért felelős.A P. falciparum és a P. vivax a leggyakoribb kórokozók, azonban a fajok elterjedése jelentős földrajzi eltéréseket mutat.
Hagyományosan a maláriát úgy diagnosztizálják, hogy az organizmusokat Giemsával festett vastag perifériás vérkeneteken mutatják be, és a plazmódiumok különböző fajtáit a fertőzött eritrocitákban való megjelenésük alapján különböztetik meg.A technika pontos és megbízható diagnózisra képes, de csak akkor, ha szakképzett mikroszkópos szakember végzi el meghatározott protokollok segítségével, ami komoly akadályokat jelent a világ távoli és szegény területein.
A Malaria Pf/Pv Ag Rapid Test ezen akadályok megoldására lett kifejlesztve.A P. falciparum hisztidinben gazdag fehérje-II-re (pHRP-II) és a P. vivax laktát-dehidrogenázra (Pv-LDH) specifikus antitesteket használ a P. falciparum és P. vivax fertőzés egyidejű kimutatására és megkülönböztetésére.A vizsgálatot képzetlen vagy minimálisan képzett személyzet is elvégezheti, laboratóriumi felszerelés nélkül
ELV
A Malaria Pf/Pv Ag Rapid Test egy laterális áramlási kromatográfiás immunvizsgálat.A tesztcsík komponensei a következőkből állnak: 1) egy bordó színű konjugált párna, amely egér anti-Pv-LDH antitestet tartalmaz arannyal konjugálva (Pv-LDH-gold konjugátumok) és egér anti-pHRP-II antitest aranykolloiddal konjugált (pHRP-II-arany konjugátumok), 2) egy P tesztmembrán (két sávot és cellulóz sávot tartalmazó nitro) zenekar).A Pv sávot előzetesen bevonják egy másik egér anti-Pv-LDH specifikus antitesttel a Pv fertőzés kimutatására, a Pf sávot poliklonális anti-pHRP-II antitestekkel a Pf fertőzés kimutatására, a C sávot pedig kecske anti-egér IgG-vel.
A vizsgálat során megfelelő mennyiségű vérmintát adagolunk a tesztkazetta mintaüregébe (S), majd lízispuffert adunk a pufferüregbe (B).A puffer olyan detergenst tartalmaz, amely lizálja a vörösvérsejteket, és különböző antigéneket szabadít fel, amelyek kapilláris hatás révén vándorolnak át a kazettában lévő csíkon.A Pv-LDH, ha jelen van a mintában, a Pv-LDH-arany konjugátumokhoz kötődik.Az immunkomplexet ezután az előzetesen bevont anti-Pv-LDH antitest rögzíti a membránon, bordó színű Pv sávot képezve, amely Pv pozitív teszteredményt jelez.Alternatív megoldásként a pHRP-II, ha jelen van a mintában, a pHRP-II-arany konjugátumokhoz kötődik.Az immunkomplexet ezután az előre bevont anti-pHRP-II antitestek felfogják a membránon, bordó színű Pf sávot képezve, amely Pf pozitív teszteredményt jelez.A tesztsávok hiánya negatív eredményre utal.A teszt tartalmaz egy belső kontrollt (C sáv), amelynek a kecske antiegér IgG/egér IgG (anti-Pv-LDH és anti-pHRPII)-arany konjugátumok immunkomplexének bordó színű sávját kell mutatnia, függetlenül a tesztsávok színfejlődésétől.Ellenkező esetben a vizsgálati eredmény érvénytelen, és a mintát újra meg kell vizsgálni egy másik eszközzel.
